荧光相机附在荧光显微镜上实验装置用安装有Lambert HiCAM高速摄像系统的荧光显微镜对斑马鱼进行研究(图2)。将鱼固定在凝胶中,从下方照射。DsRed蛋白的荧光从红细胞中发出。这种光向各个方向发射,其中一些光以相反的方向穿过激光的光路。但是,荧光通过二色镜被定向到相机上,而不是被反射回光源。任何散射的激发光都被二色镜反射。滤光片将去除任何背景光,只透射红细胞荧光发出波长的光。图像传感器将捕捉进来的荧光。捕捉将以每秒数百或数千帧的帧率下进行,每帧的曝光时间数量级在几毫秒到几毫秒的一小部分。电子倍增CCD (EMCCD)传感器的光灵敏度足以捕捉到微弱的荧光。但它们在全分辨率下只能实现大约10 ...
间的串扰,在荧光显微镜中使用四个以上探针标记样品具有挑战性,而在共振增强SRS成像中,多探针标记可以扩展到数十个不同的探针。就多重成像而言,这种能力是一个巨大的胜利,因为许多细胞生物学研究需要多个分子参与者的可视化来揭示细胞内的过程和途径。通过共振增强SRS提供的多路复用能力可以进一步推动到更低的探针浓度。通过让探针选择性仅由SRS激发过程决定,原则上可以放宽检测端的带宽。这意味着在拉曼跃迁之后,分子可以在第②步中被激发到发射电子状态,允许通过荧光发射有效地检测发色团。如果电子跃迁以成功的拉曼跃迁为条件,则可以根据其狭窄的拉曼带选择发色团,同时通过荧光检测策略提高探测灵敏度。这一过程被称为受激 ...
105。然而荧光显微镜技术可以捕捉到来自单个分子的信号,即使是敏感的CRS方法也需要成千上万个目标分子来产生可检测的信号。因此,关注提高灵敏度是扩大CRS技术使用的重要策略。CRS成像的对比度来源于分子化合物的振动特征。对于内源性分子,这种标记的数量是有限的。大量的物种和有限数量的振动特征的结合导致了重叠带结构的密集光谱。在这种背景下识别单个物种构成了振动光谱学的基本挑战。因此,提高CRS分子特异性的方法有机会使该技术得到更广泛的应用。上述这三个性能目标,高光谱成像速度,灵敏度和分子特异性,在过去十年中,已成为CRS显微镜领域发展的重要动力。更多详情请联系昊量光电/欢迎直接联系昊量光电关于昊量 ...
于广泛应用于荧光显微镜的STORM或PALM方法。超分辨率拉曼成像一直是人们追求的目标,尽管目前取得了一些有趣的突破,但新的超分辨率方法的开发仍然是该领域的热点。与腈相比,炔标记提供了两倍以上的信号强度,并且根据炔在生物分子中的定位,其拉曼信号漂移——末端炔出现在约2100 cm−1处,内部炔出现在约2200 cm−1处——如果选择适当的标记定位组合,就可以对不同的炔标记分子进行多路成像。由于这些原因,炔标记是目前应用广泛的拉曼标记策略,并已被用于研究脂类、蛋白质、糖和核苷酸。如果您对拉曼光谱成像有兴趣,请访问上海昊量光电的官方网页:https://www.auniontech.com/thr ...
Bleedthrough还是Crosstalk,这是一个问题以下三张放大40倍图片是FITC标记的肌动蛋白和Cy3标记线粒体,并使用Lumencor SPECTRA X八通道LED显微镜光源对两种荧光染料进行激发,用于显示Bleedthrough和crosstalk的不同表现以及不同的解决方案。图1.SPECTRA X 光引擎青色光通道激发,485/25滤光片,Semrock LED-DA/FI/ TR/Cy5-4X四带通多边分束器和发射滤光片在这幅图像中同时存在bleedthrough和crosstalk现象。Bleedthrough表现为图像中细胞外灰度相对较高(对比图2,已消除bleed ...
A光引擎通过荧光显微镜观察水质中蓝藻和绿藻的快速方法。当我们分析水华的成分时,荧光显微镜比DIC相位显微镜更加合适。荧光显微镜可以利用水华细胞中的色素或荧光染料来区分不同的藻类种类,而DIC相位显微镜可以显示细胞样品的细微结构和凹凸变化,不太方便区分不同的藻类,当然如果需要分辨的藻类有明显的形态以及结构方面的差异同样也可以使用。而荧光显微镜可以利用特定的荧光探针来检测水华细胞中的毒素或营养物质,从而评估水华的危害性和生理状态。DIC相位显微镜虽然可以显示细胞的三维立体影像,但对于透明或折射率差异小的样品,其对比度和分辨率较低。对蓝藻和绿藻而言,绿藻主要含有叶绿素,可以用蓝光有效地激发。蓝藻含有 ...
然后通过延时荧光显微镜监测20小时(图1B)。为了使GFP荧光真实地展现蛋白质表达水平,稳定且可重复的激发光源至关重要,这使得SOLA光引擎成为该应用的理想高性能照明光源,并且低热量与低噪声也便于获得更加优质的图像信息。除了表征起效时间和蛋白表达速率的显着细胞间变异性(图1)外,LISCA还用于确定血清蛋白对不同mRNA-脂质复合物制剂的细胞摄取的影响。图1:(A)单个GFP表达的HuH7细胞排列在微图纤连蛋白上。(B)代表GFP表达的单细胞荧光轨迹。灰色阴影区域表示mRNA -脂质复合物培养的zui初1小时。(C) 是(B)的放大区域,显示细胞间蛋白表达起效的变异。根据知识共享署名许可条款, ...
低分辨率。在荧光显微镜中,视野中的任何染料分子都会受到刺激,包括离焦平面中的染料分子。共聚焦显微技术利用共聚焦系统有效地排除了焦面以外光信号的干扰,提高了分表率,实现了光学切片。目前,共聚焦显微成像技术是生物医学领域非常重要的分析工具,借助该技术,研究人员能够对细胞中的特定成分进行光学切片和三维(3D)重建。自20世纪60年代引入柔性胃肠(GI)内窥镜检查以来,内窥镜成像技术不断取得进步。在过去的几十年中,内窥镜已被用于以微创或无创的方式观察空腔内部或人体内部器官的表面,以进行诊断或手术。目前临床上常用的白光和窄带光内窥镜无法达到细胞水平的分辨率,因此无法实现光学活检,严重降低了诊断的准确性。 ...
的商用宽视场荧光显微镜和一个钻石成像芯片组成,磁性样品安装在该芯片上。磁性对比是由在金刚石表面下设计的NV缺陷中心发出的荧光信号获得的,系统提供三种不同的成像方式,可以单独使用或组合使用。首先,在没有外加磁场的情况下,可以使用NV自旋的光学检测磁共振(ODMR)来解析磁位的等磁场线。第二以定量地绘制整个视场中每个单独位的杂散磁场,并将结果与记录介质的理论模拟进行比较。zui后,可以利用基于NV自旋弛豫对比的全光成像方式,特别适用于强离轴磁场成像。图1所有三种成像方式均在同一宽视场磁成像显微镜上进行,见图1a。图1所示为金刚石基宽场磁成像的实验布置。(a)为仪器原理图,说明了绿色激光激发的倒置显 ...
光引擎一直是荧光显微镜领域的第1选择,以其多功能性和卓越性能而著称。它为研究人员提供了激发光谱的精确控制,在z小化串扰(crosstalk)、光谱渗漏(bleed-through)、自发荧光(autofluorescence)以及其他有害背景来源的同时也优化了激发的效率【1】。SPECTRA X光引擎(2023)在其新版本中保留了用户可更换的带通滤光片,同时引入几项重大改进:扩展光谱内容:新型号采用固态LED光源,增大了光谱范围,同时增强了与带通滤光片和荧光基团的兼容性,其中包括 365 nm 和 660 nm 处的新激发窗口(图 1)。更大的输出功率:六个固态光源中的每一个的滤波可输出功率为 ...
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