TCSPC技术在荧光寿命成像显微镜中的应用荧光寿命成像显微镜(FLIM)利用荧光的寿命特性，因其对分子环境和分子构象变化的高度敏感性而得到广泛应用。FLIM已广泛应用于研究细胞代谢的自荧光分子成像。自荧光分子的FLIM以非破坏性的方式提供了对细胞健康的独特见解，经常用于研究活体动物。FLIM有利于探测荧光团的分子环境，以了解光强测量无法阐明的荧光团行为。图1中概述了时域和频域的FLIM测量，并在下面进行详细描述。简单地说，时域荧光寿命测量使用短脉冲光进行激发(相对于样品的寿命较短)，然后直接(即通过门控检测或脉冲采样)或使用时间分辨电子技术记录荧光分子的指数衰减如图1(a)及1(b)。另外，频 ...
荧光的产生与荧光寿命检测原理当处于基态的分子(图1中的S0表示)吸收的光能量等于或大于较高能级的光(S1;S2;:::;Sn)，电子在短时间内被激发到更高的能级。电子将经历振动弛豫到激发态的最低振动水平(记为S1)，这是一种称为内转换的非辐射过程。从S1电子态，分子通过辐射或非辐射过程回到基态。图1表示了在这些能级中发生的不同发光现象。荧光是分子(荧光团)通过发射可检测的光子(时间尺度为)衰减到基态的辐射过程。荧光发射发生在激发电子能级最低的位置(S1)。这种来自最低激发电子能级的强制发射确保了发射光谱保持不变，并且与激发波长无关。由于振动弛豫和内部转换中的能量损失，发射的荧光光子的能量较低( ...
LIFA荧光寿命成像在微流体中的运用——研究氧在湿滑气液界面上的输运微流体提供了一个理想的平台，允许集成“可控”的表面和直接测量附近的传输现象。Elif Karatay在特文特大学攻读博士学位期间使用微流体气泡垫层，制作了其中一个微通道壁作为由交替固体壁和微气泡组成的超疏水表面(图1)。她通过荧光寿命成像显微镜实验测量和数值估计了在短接触时间内稳定气液界面上气体吸收的动态传质。图1 (a)微流控气泡垫。(b)FLIM实验中相同设置下水中溶解氧的数值模拟，颜色条表示氧的浓度。(c)由FLIM解析的寿命场叠加在亮场显微镜图像上，显示气泡进入到水中，颜色条表示荧光寿命，以纳秒为单位。通过频域荧光寿命 ...
荧光寿命测量摘要：关于光子纳米系统研究小组对荧光寿命测量的经验及讨论。该小组致力于探索DNA纳米技术的潜力，以精确定位单个分子和不同的金属纳米粒子，从而能够制造出能够在纳米尺度上控制光并将它们与单个分子耦合的定制光学天线。因此，我们的研究结合了样品制备的湿实验室化学工作，以及不同的光学和电子显微镜技术来表征它们。哪些实验需要FYLA的超连续谱激光器?我们进行荧光寿命测量来表征混合纳米颗粒-单分子样品的耦合，为此我们需要具有高重复率p的脉冲激光器。为了进行这种表征，我们使用了皮秒p FYLA SCT 超连续激光器，其输出450 - 2300nm，重复频率为40MHz。我们将FYLA SCT与AO ...
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本拉曼光谱、荧光寿命、光电流成像的基础上新增光子反聚束功能，在方便快捷的进行零声子线的测试的同时，还可以完成光子反聚束的测量，极大的简化色心的搜寻流程，迅速判断制备工艺水平。该模块有助于研究者用拉曼光谱和光致发光（PL）成像来表征样品，快速确定目标区域（可能有单光子源的区域），随后在同一仪器来进行反聚束实验。典型案例：对已经进行过氮离子注入处理过的纳米级金刚颗粒进行光谱分析，从而精准定位符合要求的潜在色心：上图1为在5X物镜下进行快速粗扫后得到的针对零声子线峰位强度成像，图2为40X物镜下粗扫获得的强度图像，可以看到十字标志处单独存在的一个潜在优质色心，图3为该点的PL光谱图，可以清晰看到63 ...
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