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于激光的广域荧光显微镜的定量分析可能非常具有挑战性。在这种情况下,使用a|TopShape可以提供帮助。将显微镜装置中的高斯光束转换为均匀的平顶轮廓,可确保显微镜载玻片的均匀照明,从而使图像更容易识别。在CREOL的一篇I. Khaw等人的论文中了解更多关于a|TopShape在宽场荧光显微镜中的使用,可以在这里下载:https://www.asphericon.com/fileadmin/user_upload/PDFs/Flat-field_illumination_for_quantiative_fluorescence_imaging_Han_Fuchs_2018.pdf基于激光的显微 ...
TDC及TCSPC的技术原理-TCSPC高精度时间相关单光子计数模块TDC技术和TCSPC技术都是用来进行时间测量的技术手段,虽然应用范围大致相同,但是原理却不同。TDC原理如右图所示。来自单光子探测器的光电子信号脉冲和来自激光器的参考脉冲输入到延迟链中。时序逻辑查看延迟链中的数据,识别单光子和及激光脉冲的开始-停止对,并以此方式确定单光子在激光脉冲序列中的时间位置。然后,可以根据这些数据,建立通常的TCSPC/FLIM光子分布。TCSPC技术所基于的原理是:在记录低强度、高重复频率的脉冲信号时,由于光强很低,以至于在一个信号周期内探测到一个光子的概率远远小于1。因此,没有必要考虑在一个信号周 ...
分辨率来测量荧光波动引起的相关性。在 ISM 架构中测量的这种相关性,然后被用作具有高达 4倍增强横向分辨率和增强轴向分辨率的超分辨率图像的对比度。仅用几毫秒的像素驻留时间就可以获得高信噪比的超分辨率图像。单光子探测器阵列SPAD23技术源于代尔夫特理工大学和洛桑联邦理工学院 7 年的研究工作和 6 项独特技术。它是由23个六角形封装的单光子雪崩二极管组成的探测器阵列(SPADs),具有更高的灵敏度和更低的噪声。这款单光子探测器阵列SPAD23在其宽探测谱段内拥有>50%的探测效率,<100cps的暗计数水平,且因其独特的半导体工艺及设计实现了前所未有的填充因子>80%。这款带有时 ...
用SPAD512S在3D成像中的应用在从空间成像到生物医学显微镜、安全、工业检查和文化遗产等众多领域,对快速、高分辨率和低噪声3D成像的要求非常高。在这种情况下,传统的全光成像代表了3D成像领域最有前景的技术之一,因为其超高的时间分辨率:3D成像是在30M像素分辨率下每秒7帧的单次拍摄中实现的,对于1M像素分辨率为每秒180帧;无多个传感器,近场需要耗时的扫描或干涉技术。然而常规全光成像导致分辨率损失,这通常是不可接受的。我们打破这种限制的策略包括将一个全新的和基础性的采用上一代硬件和软件解决方案。基本思想是通过使用新型传感器来利用存储在光的相关性中的信息实现一项非常雄心勃勃的任务的测量协议: ...
管中的液体和荧光测量。首先,我们简要地讨论了这个过程,并展示了一些可能的测试设置,以测量透过率的光学配置。其次,我们指出如何调整光源和光谱测量引擎,以适应特定的透过率测量应用。二.透过率的测量2.1 测量程序和设置透射测量程序通常包括两个步骤:通过测量没有物体或材料的参考标准光源来收集基线和使用物体或材料进行测量。这些测量之间的偏差决定了给定物体的光谱透过率特性。本章解释了透过率测量的一般方面。对于透射率测量,需要一个探测器和参考标准光源来测量物体的透射率。例如,这个参考光源可以是LED或卤素光源。可以使用各种光源来匹配被测物体的光谱特性:光源应在任何时候发出被测物体的整个所需波长范围。在没有 ...
轮机)或发出荧光的活细胞等现象。与所要求的亮度相应的辐射水平会引起物体不可接受的升温。如果图像信号因为高帧率而变得太低了怎么办?相机噪声将是一个额外的问题。幸运的是,对于这些问题有一个高科技的解决方法:像增强器。在图像投影到高速相机的图像传感器之前,使用增强器来增强图像。增强后的图像所产生的传感器信号通常比不使用像增强器时高10000倍——在这个过程中,信号高于相机的噪声水平。像增强器是如何工作的?像增强器是一个真空管,输入端为光电阴极,中间为微通道板(MCP),输出端为荧光屏,如图1所示。光子的处理过程如下:1.图像被投射到光电阴极上。光电阴极将入射的光(光子)转换成电子。电子在真空管中发射 ...
某些物质产生荧光。2.3 γ射线的产生及性质γ射线是由放射性物质(Co、Ir等)内部原子核的衰变过程产生的。γ射线的性质与X射线相似,由于其波长比X射线短,因而射线能量高,具有更大的穿透力。例如,目前广泛使用的γ射线源Co,它可以检查250mm厚的铜质工件、350mm厚的铝制工件和300mm厚的钢制工件。2.4. 射线当射线穿透物质时,由于物质对射线有吸收和散射作用,从而引起射线能量的衰减。射线在物质中的衰减是按照射线强度的衰减是呈负指数规律变化的,以强度为I的一束平行射线束穿过厚度为δ的物质为例,穿过物质后的射线强度为:I=Ie式中I—-射线透过厚度δ的物质的射线强度;I—-射线的初始强度; ...
性,而不需要荧光标签。样品可以以完全无接触和无标签的方式被询问,防止对系统的破话。红外(IR)光谱是另一种常用的获得振动光谱的方法。红外光谱和拉曼光谱的选择规则是不同的;红外光谱对偶极子的变化很敏感,而拉曼光谱对偏振性的变化很敏感。这使得红外和拉曼成为一组特定化学键的良好工具。对于成像和显微镜的应用,在选择红外或拉曼光谱时,还有两个重要因素需要考虑。1)空间分辨率要求。红外光谱法使用红外光作为光源。拉曼可以使用可见光或近红外(NIR)激光器进行激发。由于可见或近红外激光器的波长更短,拉曼显微镜的空间分辨率可以达到亚微米级。另一方面,红外光的波长为几微米。对于许多显微镜的应用来说,其空间分辨率被 ...
能够充分激发荧光团。在比较单束和五束成像模式的实验中,我们将DOE保留在原位,并在两种实验中生成5个小波束,唯一的区别是在单束实验中,我们简单地在中间成像平面放置一个简单的虹膜隔膜,作为四个小波束路径上的屏障,只允许一个通过)。在这些条件下,在800 nm处,单个中心光束对样品的功率为24 mW,而所有五束光的功率之和对样品的功率为108 mW,其他四束的平均功率为21 mW,每个都在平均值的5%以内。检镜扫描与单光束双光子光栅扫描成像相同,并使用放大光电倍增管(PMT)进行检测(PMT: H7422-P40 Hamamatsu, Bridgewater, NJ, USA;放大器:信号恢复AM ...
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